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免疫ブロットやプロテオミクスによるタンパク質局在の解析シロイヌナズナから葉緑体小班の準備
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Preparation of Chloroplast Sub-compartments from Arabidopsis for the Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics
DOI:

10:28 min

October 19, 2018

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Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:01Harvesting of Arabidopsis Leaves
  • 02:26Purification of Crude Chloroplasts Using Differential Centrifugation
  • 03:30Purification of Intact Chloroplasts on Continuous Percoll Gradient
  • 04:51Lysis of Intact Chloroplasts Using a Hypotonic Buffer and Purification of Chloroplast Sub-Compartments on Discontinuous Sucrose Gradients
  • 06:05Washing and Concentration of Thylakoid and Envelope Membrane Systems
  • 07:09Results: Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics
  • 08:44Conclusion

Summary

Tadução automática

ここでは、シロイヌナズナの葉と 3 つメイン サブ コンパートメント (エンベロープ、質、およびチラコイド) から葉緑体を浄化する手法について述べる差動遠心、連続 Percoll の勾配の組み合わせを使用して、蔗糖不連続密度勾配。メソッドは subplastidial とイムノブロットおよびプロテオミクスによる蛋白質の細胞内局在性のため貴重です。

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