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Como quantificar a fração de proteínas fluorescentes fotoativo a granel e em células vivas
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Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
How to Quantify the Fraction of Photoactivated Fluorescent Proteins in Bulk and in Live Cells
DOI:

11:03 min

January 07, 2019

,

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:20Cell Culture and Transfection
  • 02:31Imaging and Photoactivation
  • 05:45Imaging Analysis and Algorithm for Ratiometric Intensity-based Quantification of Photoactivation Efficiency
  • 09:09Results: Maximizing Photoactivation Efficiency
  • 09:50Conclusion

Summary

Tadução automática

Aqui, apresentamos um protocolo que envolve photoactivatable espectralmente distinto geneticamente acoplado e proteínas fluorescentes. Estas quimeras de proteína fluorescente permitam a quantificação da fração de PA-FP que é fotoativo ser fluorescente, ou seja, a eficiência de fotoativação. O protocolo revela que diferentes modos de fotoativação produzem photoactivation diferentes eficiências.

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