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Utilizzo In Vitro Fluorescence Resonance Energy Transfer per studiare la dinamica dei complessi della proteina ad una scala di tempo di millisecondo
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Capítulos
- 00:04Título
- 00:33Designing the FRET Assay
- 01:12Preparation of Cul1AMC•Rbx1, the FRET Donor Protein
- 04:42Preparation of FlAsHCand1, the FRET Acceptor Protein
- 05:18Testing and Confirmation of the FRET Assay
- 06:08Measuring the Association Rate Constant
- 07:37Measuring the Dissociation Rate Constant of Cul1•Cand1 in the Presence of Skp•F-box Protein
- 08:33Results: Dynamics Of Protein Complexes
- 10:30Conclusion
Interazioni proteina-proteina sono critiche per sistemi biologici, e studi di cinetica di legame forniscono intuizioni la dinamica e la funzione dei complessi della proteina. Descriviamo un metodo che quantifica i parametri cinetici di una proteina complessa che utilizza il trasferimento di energia di risonanza di fluorescenza e la tecnica di flusso interrotto.
