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Usando na transferência de energia de ressonância de fluorescência de Vitro para estudar a dinâmica dos complexos de proteínas em uma escala de tempo de milissegundo
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Capítulos
- 00:04Título
- 00:33Designing the FRET Assay
- 01:12Preparation of Cul1AMC•Rbx1, the FRET Donor Protein
- 04:42Preparation of FlAsHCand1, the FRET Acceptor Protein
- 05:18Testing and Confirmation of the FRET Assay
- 06:08Measuring the Association Rate Constant
- 07:37Measuring the Dissociation Rate Constant of Cul1•Cand1 in the Presence of Skp•F-box Protein
- 08:33Results: Dynamics Of Protein Complexes
- 10:30Conclusion
Interações da proteína-proteína são essenciais para sistemas biológicos, e estudos sobre a cinética de ligação fornecem insights sobre a dinâmica e a função dos complexos da proteína. Nós descrevemos um método que quantifica os parâmetros cinéticos de uma proteína complexa usando transferência de energia de ressonância de fluorescência e a técnica de fluxo parou.
