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ヌクレアーゼフリー酸素スカベンジャープロトカテク酸プロトカテクエート3,4-ジオキシゲナーゼの発現と精製
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JoVE Journal Bioquímica
Expression and Purification of Nuclease-Free Oxygen Scavenger Protocatechuate 3,4-Dioxygenase
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ヌクレアーゼフリー酸素スカベンジャープロトカテク酸プロトカテクエート3,4-ジオキシゲナーゼの発現と精製

DOI:
10.3791/59599-v

•

10:14 min

•

November 08, 2019

•

, , ,
1Cancer Biology and Genetics, College of Medicine,The Ohio State University

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:25Inducing PCD (protocatechuate 3,4 dioxygenase) Expression in E. coli
  • 03:39Nickel Affinity Chromatography Purification of PCD
  • 04:46Nuclease Activity Assay
  • 06:19PCA (Protocatechuic Acid) Oxidation and Nuclease Activity Assays
  • 08:01Results: Purification of PCD
  • 09:23Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

プロトカテクテク酸3,4-ジオキシゲナーゼ(PCD)は、その基質プロトカテク酸(PCA)を使用して水系から遊離した二原子酸素を酵素的に除去することができる。このプロトコルは、この酸素清掃酵素の発現、精製、および活性分析について説明する。

Tags

Keywords: Nuclease-freeOxygen ScavengerProtocatechuate 34-dioxygenasePCD ExpressionE. Coli BL21TransformationLB-ampicillin AgarProtein ExpressionIPTGAmmonium Iron SulfateCentrifugationSDS-PAGE

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