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종양 세포에서 MicroRNA 수준, 기능 및 관련 표적 유전자를 평가하기 위한 시험관 내 프로토콜

JoVE Journal
Genética

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JoVE Journal Genética

An In Vitro Protocol for Evaluating MicroRNA Levels, Functions, and Associated Target Genes in Tumor Cells

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종양 세포에서 MicroRNA 수준, 기능 및 관련 표적 유전자를 평가하기 위한 시험관 내 프로토콜

DOI:

10.3791/59628-v

•

09:45 min

•

May 21, 2019

•

Hyun Ah Seo, Cho Yean Hwang, Sokviseth Moeng, Jong Kook Park

¹Department of Biomedical Science and Research Institute for Bioscience & Biotechnology,Hallym University

Capítulos

00:04Título
01:06MicroRNA (miRNA) Mimic Transfection
02:03Sulforhodamine B (SRB) Assay
03:20Generation of a Dose-response Curve
04:35Verification of the Direct Target Gene of a miRNA of Interest
06:37Luciferase Assay
07:52Results: miRNA-107 Negatively Regulates Proliferation of PANC-1 Cells
08:53Conclusion

Summary

Tadução automática

이 프로토콜은 프로브 기반 실시간 중합효소 연쇄 반응(PCR), 설포호다민 B(SRB) 분석, 3' 번역되지 않은 영역(3' UTR) 클로닝 및 루시퍼라제 분석제를 사용하여 관심 있는 miRNA의 표적 유전자를 확인하고 miRNA의 기능을 이해합니다.

Tags

MicroRNA MicroRNA Target In Vitro Protocol Tumor Cells Cell Viability Assay Transfection MicroRNA Mimic MicroRNA-107

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