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Un protocolo in vitro para evaluar los niveles, funciones y genes objetivo asociados de MicroRNA en células tumorales
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Genética
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JoVE Journal Genética
An In Vitro Protocol for Evaluating MicroRNA Levels, Functions, and Associated Target Genes in Tumor Cells
DOI:

09:45 min

May 21, 2019

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Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:06MicroRNA (miRNA) Mimic Transfection
  • 02:03Sulforhodamine B (SRB) Assay
  • 03:20Generation of a Dose-response Curve
  • 04:35Verification of the Direct Target Gene of a miRNA of Interest
  • 06:37Luciferase Assay
  • 07:52Results: miRNA-107 Negatively Regulates Proliferation of PANC-1 Cells
  • 08:53Conclusion

Summary

Tadução automática

Este protocolo utiliza una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) basada en sondas en tiempo real, un ensayo de sulforhodamine B (SRB), 3' regiones no traducidas (3' UTR) clonación, y un ensayo de luciferasa para verificar los genes diana de un miRNA de interés y para entender las funciones de los miRNAs.

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