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포유류 세포에 있는 풀린 CRISPR 기지를 둔 유전 스크린
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Pooled CRISPR-Based Genetic Screens in Mammalian Cells
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포유류 세포에 있는 풀린 CRISPR 기지를 둔 유전 스크린

DOI:
10.3791/59780-v

•

00:09 min

•

September 04, 2019

•

, , , ,
1Donnelly Centre,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Institute for Biomaterials and Biomedical Engineering,University of Toronto

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:36Pooled CRISPR sgRNA Lentiviral Library Plasmid Amplification
  • 02:24Large-scale CRISPR sgRNA Library Lentivirus Production
  • 03:47Primary Screen Infection, Selection, and Cell Passaging
  • 05:41CRISPR Sample Preparation and Sequencing
  • 06:43Results: Genome-scale CRISPR Screening
  • 07:54Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

CRISPR-Cas9 기술은 모든 세포 유형에서 포유류 게놈을 정밀하게 편집하는 효율적인 방법을 제공하며 게놈 전체의 유전 적 스크린을 수행하는 새로운 수단을 나타냅니다. 풀링된 게놈 전체 CRISPR-Cas9 스크린의 성공적인 성능을 위해 필요한 단계를 논의하는 상세한 프로토콜이 여기에 제공됩니다.

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Keywords: CRISPRGenetic ScreensMammalian CellsDrop-out ScreensGuide LibrariesEssential GenesCancerDrug MechanismsCell LinesLentivirusAntibiotic SelectionPlasmid TransformationElectrocompetent CellsLBCarbenicillinPlasmid Purification293T CellsTransfection

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