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Introduzindo um nocaute genético diretamente no estágio Amastigote do Trypanosoma cruzi usando o sistema crispr/Cas9
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Genética
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JoVE Journal Genética
Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System
DOI:

06:13 min

July 31, 2019

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Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:35Differentiation of Trypomastigotes into Extracellular Amastigotes
  • 01:54Electroporation of Extracellular Amastigotes
  • 03:01Monitoring the Growth of Knockout Cells
  • 04:35Results: Growth Monitoring and Phenotypic Differences of Knockout Parasites
  • 05:41Conclusion

Summary

Tadução automática

Aqui, nós descrevemos um protocolo para introduzir um nocaute do gene no amastigotas extracelular de Trypanosoma cruzi, usando o sistema de crispr/Cas9. O phenotype do crescimento pode ser seguido acima pela contagem da pilha da cultura axênicos do amastigotas ou pela proliferação de amastigotas intracelular após a invasão da pilha de anfitrião.

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