É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:04Título
- 00:39Preparation of Crude Mitochondrion from Maize Developing Kernels
- 01:45RNA 5’ Polyphosphatase Treatment and Circularization
- 02:33Reverse Transcription and Normalization
- 03:30PCR Amplification and Determination of Transcript Termini
- 04:34Verification of the cRT-PCR Mapping Results by RNA Gel Blot Hybridization
- 05:00Discrimination of Primary and Processed 5’ Ends
- 05:26Determination of Maize mRNA Termini Using the Circular RT-PCR-based Strategy
- 07:05Conclusion
Мы представляем круговую стратегию на основе РТ-ПЦР путем объединения круговой РТ-ПЦР, количественного RT-PCR, полифосфатазы РНК 5 и Северной подья. Этот протокол включает в себя шаг нормализации, чтобы свести к минимуму влияние нестабильной 5' трифосфат, и он подходит для распознавания и отображения первичных и обработанных стенограмм стабильно накопленных в митохондрии кукурузы.
