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GEN1によるホリデイ接合分解能のリアルタイム調査のための単分子フェルスター共鳴エネルギー伝達法

JoVE Journal
Genética

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Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer Methods for Real-Time Investigation of the Holliday Junction Resolution by GEN1

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GEN1によるホリデイ接合分解能のリアルタイム調査のための単分子フェルスター共鳴エネルギー伝達法

DOI:

10.3791/60045-v

•

11:27 min

•

September 18, 2019

•

Mohamed A. Sobhy*¹, Amer Bralić*¹, Vlad-Stefan Raducanu, Muhammad Tehseen, Yujing Ouyang, Masateru Takahashi, Fahad Rashid, Manal S. Zaher, Samir M. Hamdan

¹Laboratory of DNA Replication and Recombination, Biological and Environmental Sciences and Engineering Division (BESE),King Abdullah University of Science and Technology (KAUST)

Capítulos

00:04Título
01:22Flow Cell Preparation
03:01Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer (smFRET) Experiments
06:25Sm-FRET Data Analysis
07:10Two-Color Alternating Excitation (ALEX) FRET Experiment and Analysis
08:24Results: Representative Real-Time HJ Resolution Investigation
10:13Conclusion

Summary

Tadução automática

ここで提示されるのは、HJ分解能を研究するために単分子フェルスター共鳴エネルギー伝達を行うためのプロトコルである。解離定数を決定するために、2 色交互励起が使用されます。シングルカラータイムラプスsmFRETは、リアルタイム切断アッセイに適用され、HJ分解能の前にドウェル時間分布を得ます。

Tags

Single-molecule FÃ¶rster Resonance Energy Transfer (FRET)Holliday Junction GEN1 Real-time Investigation Enzymatic Systems Single-molecule Methods Biomolecular Interactions Optical And Force Measurements Single-channel Flow Cell Quartz Slide Double Adhesive Sheet Polytetrafluoroethylene Tweezers Polyethylene Tubing Epoxy Glue Avidin PBS

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