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Arricchimento simultaneo dell'affinità di due modifiche post-traduzionali per la quantificazione e la localizzazione del sito
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Simultaneous Affinity Enrichment of Two Post-Translational Modifications for Quantification and Site Localization
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Arricchimento simultaneo dell'affinità di due modifiche post-traduzionali per la quantificazione e la localizzazione del sito

DOI:
10.3791/60780-v

•

12:11 min

•

February 27, 2020

•

, , , , ,
1Buck Institute for Research on Aging

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 01:19Desalting of Non-Enriched Proteolytic Peptides via Large-Scale Solid-Phase Extraction
  • 02:46Simultaneous Enrichment of K-acetylated and K-succinylated Peptides with Immunoaffinity Beads
  • 04:30Elution of the Peptides Bound to Antibody Beads
  • 07:02Data Acquisition Using DDA (Data-Dependent Acquisition) and DIA (Data-Independent Acquisition)
  • 10:02Results: One-pot Enrichment of PTMs
  • 11:19Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Questo flusso di lavoro descrive contemporaneamente le prestazioni dell'arricchimento in termini di tempo ed efficiente in termini di costi di più modifiche post-traslazionali proteiche (PPM) per l'analisi proteomica globale quantitativa. Il protocollo utilizza l'arricchimento PTM a livello di peptide con più anticorpi coniugati, seguito dall'analisi della spettrometria di massa di acquisizione indipendente dai dati per ottenere informazioni biologiche sul crosstalk PTM.

Tags

Keywords: Simultaneous Affinity EnrichmentPost-translational ModificationsQuantificationSite LocalizationMass SpectrometryAcetylationSuccinylationProtein ModificationsPTMsReproducibilityC18 ResinImmunoaffinity Purification

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