Simultaneous Affinity Enrichment of Two Post-Translational Modifications for Quantification and Site Localization

00:04Introduction
01:19Desalting of Non-Enriched Proteolytic Peptides via Large-Scale Solid-Phase Extraction
02:46Simultaneous Enrichment of K-acetylated and K-succinylated Peptides with Immunoaffinity Beads
04:30Elution of the Peptides Bound to Antibody Beads
07:02Data Acquisition Using DDA (Data-Dependent Acquisition) and DIA (Data-Independent Acquisition)
10:02Results: One-pot Enrichment of PTMs
11:19Conclusion

Summary

Tadução automática

Este flujo de trabajo describe el rendimiento del enriquecimiento eficiente en tiempo y costo de múltiples modificaciones post-traduccionales de proteínas (PTF) simultáneamente para el análisis proteómico global cuantitativo. El protocolo utiliza el enriquecimiento de PTM a nivel de péptido con múltiples anticuerpos conjugados, seguido de un análisis de espectrometría de masas de adquisición independiente de datos para obtener información biológica sobre la conversación cruzada PTM.

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

Principios de la recombinasa específica de sitio (RSS) Tecnología

La detección de modificaciones post-traduccionales de los nativos intactos nucleosomas por ELISA

La cuantificación de proteínas mediante el enriquecimiento de inmunoafinidad péptido acoplado a espectrometría de masas

Simultaneous Multicolor Imaging of Biological Structures with Fluorescence Photoactivation Localization Microscopy

Florecimiento extracción de proteínas de levadura y purificación para el Estudio de la función, las interacciones y modificaciones post-traduccionales

Identificación de modificaciones post-traduccionales de la proteína vegetal Complejos

Alta resolución Cuantificación de celulosa cristalina acumulación en<em> Arabidopsis</em> Las raíces para monitorear la célula específica de tejido de pared Modificaciones

Flujo de trabajo completo para el análisis de las histonas modificaciones post-traduccionales El uso de espectrometría de masas de abajo hacia arriba: A partir de la histona Extracción de Análisis de Datos

Cuantificación de proteína específica lisina acetilación y Succinylation estequiometría usando Spectrometry total de la adquisición de datos-independiente

Alinee y Worm_CP, dos tuberías de código abierto para el enderezamiento y cuantificación de datos de imagen de fluorescencia obtenidos de Caenorhabditis elegans

Enriquecimiento de afinidad simultánea de dos modificaciones post-traduccionales para la cuantificación y la localización del sitio

•

•

•

Capítulos