使用动脉内血压监测和通气通过气管切除术的小鼠脑死亡诱导

虽然捐赠者脑死亡后捐赠是固体器官移植的主要来源，但脑功能的不可逆转的丧失会导致病理生理变化，导致全身炎症反应。这种脑死亡诱导的穆林模型允许使用各种各样的分析工具和敲除模型来研究脑死亡调节的路径。在确认对踏板反射缺乏反应并去除上腹部毛后，动脉导管，用 70% 乙醇对裸露的皮肤进行消毒，并使用解剖剪刀在皮肤上进行中线切口。

使用钳子，钝解解亚肌腺和颈部肌肉组织，并分离组织，以暴露常见的胡萝卜动脉。放置三个 8-0右侧普通胡萝卜动脉下方的丝绸连字，并在近端结字上放置一个夹子。使动脉的张力，使水流暂停，并关闭最直的连结。

插入 26 量的动脉导管，通过切口颅面上的一个小预制皮肤孔。如果流明太大，无法减少回流，用所有三种缝合线固定导管，则使用单个 5-0 单丝不可吸收，将导管固定到预成型皮肤孔附近的皮肤上。用钳子挤压导管。要进行气管切除术， 用钳子钝解解前切肌肉， 并放置两个 8 - 0气管下面的丝绸连字。

在两个气管卡皮之间插入通风管，以避免单方面通风，然后用两个准备好的连字固定管，然后用 6-0 单丝不吸的运行缝合线关闭皮肤，并通风鼠标的频率为每分钟 150 次，潮汐体积为 200 微升。为了在实验动物中诱发脑死亡，将鼠标安排到易发位置，用钳子握住皮肤，用手术剪刀将皮肤从头骨上取下。在左皮层上方钻一毫米的卡钳孔，用钝钳穿透头骨的最终组织桥。

移除任何锋利的边缘后，插入一个充气导管，预加盐水，所有空气都已疏散。当导管完全在颅腔内时，使用注射器泵在 10 到 15 分钟内以每分钟约 0.1 毫米的速度开始充气导管。当脑死亡发生时，停止气球导管的膨胀，并在鼠标上放置加热毯以避免体温过低。

脑死亡确认后，定期监测和记录血压，每30分钟注入100微升盐水，以稳定动物的血压。脑死亡四小时后，排除任何动物不跳动的心脏，并收获鼠标器官和感兴趣的组织，根据标准协议。脑死亡诱导后，血压呈现初始高血压峰值，然后是长期的低血压阶段。

另一个成熟的观察是，脑死亡诱导导致免疫系统的激活。事实上，在这个模型中，经过四个小时的脑死亡后，在mRNA水平上观察到免疫标记的器官特异性上调节。在脑死亡的预定义期后，器官可以收获用于直接分析或后续器官移植。

该模型将有助于深入研究脑死亡诱发损伤的影响，并且已经揭示了补充活化和白细胞迁移的新见解。