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Traduzindo a Purificação da Afinidade ribossófica (TRAP) para investigar o desenvolvimento raiz arabidopsis thaliana em uma escala específica de tipo de célula
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Capítulos
- 00:04Introduction
- 01:08Propagation and Sterilization
- 01:36Plating
- 02:20Tissue Treatment (Optional)
- 02:51Harvesting
- 03:39Tissue Grinding and Homogenization
- 04:39Total RNA Sample Collection, Crude Extract Clearing, Bead Washing
- 05:34Immunoprecipitation
- 06:49Lab Supply Reconditioning
- 07:38Results: Representative Cell Type-Specific GFP Expression and Translational Ribosome Affinity Purification (TRAP)/Polysome RNA Quality Assessment
- 08:47Conclusion
Traduzir purificação de afinidade costela (TRAP) oferece a possibilidade de dissecar programas de desenvolvimento com processamento mínimo de órgãos e tecidos. O protocolo produz RNA de alta qualidade a partir de células direcionadas com uma subunidade ribossômica rotulada como proteína fluorescente verde (GFP). Ferramentas de análise a jusante, como qRT-PCR ou RNA-seq, revelam perfis de expressão específicos de tecido e célula.
