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Rt-PCR quantitatif à haut débit dans les échantillons de C. elegans en vrac et en vrac à l’aide de la technologie nanofluidique
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High-Throughput Quantitative RT-PCR in Single and Bulk C. elegans Samples Using Nanofluidic Technology
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Rt-PCR quantitatif à haut débit dans les échantillons de C. elegans en vrac et en vrac à l’aide de la technologie nanofluidique

DOI:
10.3791/61132-v

•

08:19 min

•

May 28, 2020

•

, , , , , , ,
1Babraham Institute, 2Gurdon Institute,University of Cambridge, 3Department of Genetics,University of Cambridge, 4Wellcome Trust Genome Campus,Wellcome Trust Sanger Institute, 5Laboratory of Virology and Infectious Disease,The Rockefeller University

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:46Worm-to-CT Worm Lysis
  • 02:08Reverse Transcription (RT) for Bulk Samples
  • 02:38Target Specific Preamplification
  • 03:19Exonuclease I Treatment
  • 03:53Sample Mix Preparation
  • 04:48Nanofluidic Chip Priming and Loading
  • 06:00Results: Representative Worm-to-CT Analysis
  • 07:45Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Dans cet article, un protocole à haut débit pour une détermination rapide et fiable des niveaux d’expression des gènes dans des échantillons de C. elegans en vrac ou en vrac est décrit. Ce protocole n’exige pas l’isolement d’ARN et produit l’ADND directement à partir d’échantillons. Il peut être utilisé avec des plates-formes qPCR nanofluidiques multiplexées à haut débit.

Tags

RT-qPCRC. ElegansNanofluidic TechnologyHigh-throughputSingle-sampleBulk-sampleRNA IsolationLysis BufferReverse TranscriptionPre-amplificationGene ExpressionInterindividual Variability

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