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シームレスなゲノム編集によるヒト多能性幹細胞への点突然変異の導入

JoVE Journal
Genética

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JoVE Journal Genética

Introducing Point Mutations into Human Pluripotent Stem Cells Using Seamless Genome Editing

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シームレスなゲノム編集によるヒト多能性幹細胞への点突然変異の導入

DOI:

10.3791/61152-v

•

09:03 min

•

May 10, 2020

•

Yu Wang, Andrew J. H. Smith, David C. Hay

¹MRC Centre for Regenerative Medicine,University of Edinburgh

Capítulos

00:05Introduction
00:40Gene Editing of Human Pluripotent Stem Cells
06:57Results: Genetic Editing in Human Pluripotent Stem Cells
08:06Conclusion

Summary

Tadução automática

ここで、 piggyBacベースのドナープラスミドとCas9ニッカーゼ変異体を用いたヒト多能性幹細胞におけるシームレスな遺伝子編集のための詳細な方法について述べる。ヒト胚性幹細胞(hESC)の肝細胞核因子4α(HNF4α)遺伝子座のエクソン8に2点変異を導入した。

Tags

Human Pluripotent Stem Cells Genome Editing CRISPR-Cas9 Seamless Genome Editing Targeted Gene Insertion Laminin 521 MTeSR1 Medium Cell Dissociation Nucleofection Single Guide RNA Targeting Vector

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