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Introduzindo mutações pontuais em células-tronco pluripotentes humanas usando edição de genoma contínua
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Introducing Point Mutations into Human Pluripotent Stem Cells Using Seamless Genome Editing

Introduzindo mutações pontuais em células-tronco pluripotentes humanas usando edição de genoma contínua

DOI:
10.3791/61152-v

•

09:03 min

•

May 10, 2020

•

, ,
1MRC Centre for Regenerative Medicine,University of Edinburgh

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:40Gene Editing of Human Pluripotent Stem Cells
  • 06:57Results: Genetic Editing in Human Pluripotent Stem Cells
  • 08:06Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aqui, descrevemos um método detalhado para edição de genes sem costura em células-tronco pluripotentes humanas usando um plasmídeo doador baseado em piggyBac e o mutante Cas9 nickase. Duas mutações pontuais foram introduzidas no éxon 8 do locus do fator nuclear 4 alfa do hepatócito (HNF4α) em células-tronco embrionárias humanas (hESCs).

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Human Pluripotent Stem CellsGenome EditingCRISPR-Cas9Seamless Genome EditingTargeted Gene InsertionLaminin 521MTeSR1 MediumCell DissociationNucleofectionSingle Guide RNATargeting Vector

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