This content is Free Access.
Capítulos
- 00:04Introduction
- 00:36Donor/Acceptor Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Pair Selection
- 01:13Cell Synchronization
- 01:42FRET/Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) Acquisitions
- 02:50Donor/Acceptor Pair Delta Lifetime Calculation and FLIM Value Comparison
- 03:53Results: Representative Aurora Kinase A (AURKA) FRET Biosensor and Negative Control Images
- 05:52Conclusion
Aktiveringen av den multifunktionella Ser/Thr kinas AURKA kännetecknas av dess autofosforylering på Thr288. Fluorescerande sonder som förlitar sig på FRET kan diskriminera mellan dess inaktiva och aktiverade tillstånd. Här illustrerar vi några strategier för sondteknik, tillsammans med ett snabbt FRET-protokoll för att följa kinasaktiveringen genom mitos.
