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Polarización de células y análisis de células y análisis derivados de monocitos humanos M1 y M2 con citometría de flujo sobre la infección por mycobacterium tuberculosis
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1Center for Infectious Medicine (CIM), Department of Medicine Huddinge, ANA Futura,Karolinska Institutet, 2Infectious Diseases Division,International Centre for Diarrhoeal Disease Research, Bangladesh, 3Clinical Microbiology, Department of Laboratory Medicine (Labmed), ANA Futura,Karolinska Institutet, 4Childhood Cancer Research Unit, Department of Women’s and Children’s Health,Karolinska Institutet
Capítulos
- 00:04Introduction
- 00:44Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Isolation
- 01:40Monocyte-Derived Cell Differentiation and Polarization
- 03:25Mycobacterium tuberculosis (Mtb) Culture
- 05:00Monocyte-Derived Cell Mtb Infection
- 06:03Flow Cytometry Staining and Analysis
- 07:40Results: Representative Phenotypic M1 and M2 Cell Characterization Before and After Mtb Infection
- 09:47Conclusion
Este protocolo proporciona un método para estudiar la infección por Mycobacterium tuberculosis en macrófagos polarizados M1 o M2 humanos basados en la diferenciación de monocitos de sangre periférica a células similares al macrófago que están infectadas con la cepa virulenta H37Rv etiquetada por GFP, y analizada con citometría de flujo utilizando un panel de 10 colores que incluye la expresión de marcadores M1/M2 seleccionados.
