An Economical and Versatile High-Throughput Protein Purification System Using a Multi-Column Plate Adapter

Florence B Kineavy; Alex A Davies; Molly R Mitchell; Daniel Lay; Matt J Dominguez; Elliott  J Stollar

doi:10.3791/62075

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Un sistema de purificación de proteínas de alto rendimiento económico y versátil que utiliza un adaptador de placa multicolumna

JoVE Journal
Bioquímica
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An Economical and Versatile High-Throughput Protein Purification System Using a Multi-Column Plate Adapter

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Un sistema de purificación de proteínas de alto rendimiento económico y versátil que utiliza un adaptador de placa multicolumna

DOI:

10.3791/62075-v

•

10:08 min

•

May 21, 2021

•

Florence B Kineavy, Alex A Davies, Molly R Mitchell, Daniel Lay, Matt J Dominguez, Elliott J Stollar

¹School of Life Sciences,University of Liverpool, ²Health Sciences Center,Texas Tech University

Capítulos

00:00Introduction
00:58Ni-NTA Chromatography- Purification of 24 Different Proteins: Preparing the Purification Set-up
03:00Ni-NTA Chromatography- Purification of 24 Different Proteins: Loading, Washing and Eluting
04:47Ion Exchange- Simultaneous Purification of 6 Different Proteins: Preparing the Purification Set-up
06:15Ion Exchange- Simultaneous Purification of 6 Different Proteins: Loading, Washing and Eluting
08:25Results: Representative UV Spectroscopy and SDS PAGE Analyses

Summary

Tadução automática

Un adaptador de placa multicolumna permite que las columnas de cromatografía se interconectan con placas de recolección de múltiples pozos para la afinidad paralela o la purificación del intercambio iónico, proporcionando un método económico de purificación de proteínas de alto rendimiento. Se puede utilizar bajo gravedad o vacío produciendo cantidades de miligramos de proteína a través de instrumentación asequible.

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