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Zuverlässige Entwicklung und Kontrolle stabiler optogenetischer Genschaltkreise in Säugetierzellen
JoVE Journal
Bioengenharia
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JoVE Journal Bioengenharia
Reliably Engineering and Controlling Stable Optogenetic Gene Circuits in Mammalian Cells
DOI:

09:20 min

July 06, 2021

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Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:43Gene Circuit Design
  • 01:39Stable Cell Line Engineering
  • 02:27Light Plate Apparatus Induction Assays
  • 04:08Fluorescence Microscopy of Light-Induced Engineered Cells
  • 04:32Flow Cytometry of Light-Induced Engineered Cells
  • 05:14Immunofluorescence of Gene Circuit Components
  • 07:16Results: Gene Expression Analysis in Engineered Optogenetic Cell Lines
  • 08:49Conclusion

Summary

Tadução automática

Die zuverlässige Kontrolle lichtempfindlicher Säugetierzellen erfordert die Standardisierung optogenetischer Methoden. Um dieses Ziel zu erreichen, skizziert diese Studie eine Pipeline von Genschaltkreiskonstruktion, Zelltechnik, optogenetischem Gerätebetrieb und Verifikationsassays, um die Untersuchung der lichtinduzierten Genexpression unter Verwendung eines optogenetischen Genschaltkreises mit negativer Rückkopplung als Fallstudie zu standardisieren.

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