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Bewertung von Proteininteraktionen in lebenden Zellen mit FRET-sensibilisierter Emission
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Biologia
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JoVE Journal Biologia
Assessing Protein Interactions in Live-Cells with FRET-Sensitized Emission
DOI:

09:15 min

April 22, 2021

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Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 01:12Plasmid Construction
  • 01:52Cell Culture and Transfection
  • 02:41FRET Imaging
  • 05:42Image Analysis for Detecting Absolute FRET Efficiencies Using Donor Quenching and Sensitized Emission
  • 07:01Results: Quantification of FRET Images
  • 08:28Conclusion

Summary

Tadução automática

Der Förster-Resonanz-Energietransfer (FRET) zwischen zwei Fluorophor-Molekülen kann zur Untersuchung von Proteininteraktionen in der lebenden Zelle verwendet werden. Hier wird ein Protokoll zur Verfügung gestellt, wie FRET in lebenden Zellen gemessen werden kann, indem die sensibilisierte Emission des Akzeptors und das Abschrecken des Donormoleküls mittels konfokaler Laser-Scanning-Mikroskopie detektiert werden.

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