Journal
/
Bioquímica
/
Identifikation af bindingsproteiner fra små ligands med Ligand Assays differentierede radiale kapillærhandling (DRaCALA)
JoVE Journal
Bioquímica
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Bioquímica
Identifying the Binding Proteins of Small Ligands with the Differential Radial Capillary Action of Ligand Assay (DRaCALA)

Identifikation af bindingsproteiner fra små ligands med Ligand Assays differentierede radiale kapillærhandling (DRaCALA)

DOI:
10.3791/62331-v

•

09:26 min

•

March 19, 2021

•

, ,
1Department of Biology,University of Copenhagen

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:42Preparation of Whole Cell Lysates
  • 01:43Nickel-Nitrilotriacetic Acid (Ni-NTA) Affinity Purification of Relseq and GppA
  • 02:55Gel Filtration
  • 03:33Synthesis of 32P-Labeled Guanosine Pentaphosphate (pppGpp) and Guanosine Tetraphosphate (ppGpp)
  • 05:08DRaCALA Screening of the Target Proteins of (p)ppGpp
  • 06:37Quantification and Identification of Potential Target Proteins
  • 07:46Results: DRaCALA Plate Screening and Quantification
  • 08:39Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Den differentierede Radial Kapillæraktion fra Ligand Assay (DRaCALA) kan bruges til at identificere små ligand bindende proteiner i en organisme ved hjælp af et ORFeome-bibliotek.

Tags

Keywords: DRaCALASmall Signaling MoleculesEffector ProteinsOVium LibraryE. ColiIPTGLysis BufferNickel-NTA ResinWashing BufferElution BufferGel Filtration

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/62331?article_type=v

Identifikation af små molekyler-bindende proteiner i en Native Cellular Environment af live-cell fotoaffinitetsmærkning
check_url/pt/62331?article_type=v

Fremgangsmåde til at identificere småmolekylære inhibitorer af protein-protein-vekselvirkning mellem HCN1 og TRIP8b
check_url/pt/62331?article_type=v

Måling af Biomolekylær DSC profiler med termolabile ligander til hurtigt karakterisere foldning og bindende interaktioner
check_url/pt/62331?article_type=v

Kvælstof kavitation og differentieret centrifugering giver mulighed for overvågning fordelingen af perifere Membranproteiner i kulturperler celler
check_url/pt/62331?article_type=v

Rab10 fosforylering påvisning af LRRK2 aktivitet ved hjælp af SDS-PAGE med en fosfat-bindende Tag
check_url/pt/62331?article_type=v

Indfange interaktion kinetik af en Ion-kanal Protein med små molekyler af Bio-lag interferometri Assay
check_url/pt/62331?article_type=v

Metode til effektiv hvorved man genfolder og rensning af Chemoreceptor Ligand bindende domæne
check_url/pt/62331?article_type=v

Påvisning af små GTPase Prenylation og GTP bindende ved hjælp af membran fraktionering og GTPase-forbundet Immunosorbent Assay
check_url/pt/62331?article_type=v

Analyse af AtHIRD11 iboende lidelse og bindende mod metalioner af kapillar gelelektroforese og affinitet kapillær elektroforese
check_url/pt/62331?article_type=v

En semi-High-gennemløb tilpasning af NADH-koblede ATPase assay til screening små molekyle hæmmere

Read Article