Här beskriver vi stadierna av provtagning och förberedelse för RIBO-seq i bakterier. Sekvensering av de bibliotek som utarbetats enligt dessa riktlinjer resulterar i tillräckliga data för omfattande bioinformatisk analys. Protokollet vi presenterar är enkelt, använder standard laboratorieutrustning och tar sju dagar från lysis till att få bibliotek.