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使用接近-连接-测定法对不同流体剪切应力条件下TGFβ/BMP/SMAD信号传导的可视化和定量

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Visualization and Quantification of TGFβ/BMP/SMAD Signaling under Different Fluid Shear Stress Conditions using Proximity-Ligation-Assay

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使用接近-连接-测定法对不同流体剪切应力条件下TGFβ/BMP/SMAD信号传导的可视化和定量

DOI:

10.3791/62608-v

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11:38 min

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September 14, 2021

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Paul-Lennard Mendez², Leon Obendorf, Petra Knaus

¹Institute for Chemistry and Biochemistry,Freie Universität Berlin, ²International Max-Planck Research School for Biology and Computation

Capítulos

00:05Introduction
00:40Cell Culture and Fluid Shear Stress Exposure
02:55Fixation
04:58Blocking and Incubation with Primary Antibody
06:28Incubation with PLA Probe and Ligation
07:34Amplification and Mounting
09:14Results: Effect of Shear Stress on the SMAD Protein Interactions
11:02Conclusion

Summary

Tadução automática

在这里，我们建立了一个方案，使用暴露于病理和生理流体剪切应激条件下的内皮细胞中的接近连接测定（PLA）同时可视化和分析多个SMAD复合物。

Tags

TGF-β/BMP/SMAD Signaling Proximity Ligation Assay Fluid Shear Stress Microfluidic Flow Channels HUVEC Cells Transcription Factor Complexes Vascular Biology

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