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Imunologia e Infecção

대형 동물 모델의 전임상 연구를 위한 세포 스택에 있는 아데노 관련 바이러스 벡터의 생산

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Production of Adeno-Associated Virus Vectors in Cell Stacks for Preclinical Studies in Large Animal Models

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대형 동물 모델의 전임상 연구를 위한 세포 스택에 있는 아데노 관련 바이러스 벡터의 생산

DOI:

10.3791/62727-v

•

07:21 min

•

June 30, 2021

•

Amira D. Rghei, Brenna A. Y. Stevens*¹, Sylvia P. Thomas*¹, Jacob G. E. Yates*¹, Benjamin M. McLeod, Khalil Karimi, Leonardo Susta, Byram W. Bridle, Sarah K. Wootton

¹Department of Pathobiology,University of Guelph

Capítulos

00:04Introduction
00:46Double Plasmid Transfection of HEK293 Cells in Cell Stacks
02:30Harvesting Adeno-Associated Virus AAV and Chemical Lysis of The Transfected HEK293 Cells
03:23AAV Vector Purification Using Heparin Affinity Chromatography
05:45Results: Serum Human Monoclonal Antibody (hIgG) Expression in Animals Upon Administration of AAV6.2FF-hIgG
06:41Conclusion

Summary

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여기서 는 세포 스택 및 친화성 크로마토그래피 정제에서 자란 부착 된 HEK 293 세포를 사용하여 연구 급 AAV 벡터의 대규모 생산을위한 상세한 절차를 제공합니다. 이 프로토콜은 지속적으로 >1 x^{10 13} 벡터 게놈/mL을 산출하여 대규모 동물 연구에 적합한 벡터 양을 제공합니다.

대형 동물 모델의 전임상 연구를 위한 세포 스택에 있는 아데노 관련 바이러스 벡터의 생산

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