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Capítulos
- 00:04Introduction
- 00:36Cryo-Fluorescence Light Microscopy (Cryo-FLM) of Plunge‐Frozen Grids with Cells
- 01:51Focused Ion Beam (FIB) Milling
- 05:47Correlative Transmission Electron Microscopy (TEM)
- 07:02Results: Visualizing the Endocytic Protein Deposit in the Cell with Cryo‐ET
- 07:38Conclusion
Hier stellen wir eine Pipeline für das 3D-korrelative fokussierte Ionenstrahlfräsen vor, um die Präparation zellulärer Proben für die Kryo-Elektronentomographie zu steuern. Die 3D-Position von fluoreszenzmarkierten Proteinen von Interesse wird zunächst durch Kryo-Fluoreszenzmikroskopie bestimmt und dann gezielt gemahlen. Das Protokoll eignet sich für Säugetier-, Hefe- und Bakterienzellen.
