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Capítulos
- 00:04Introduction
- 00:36Cryo-Fluorescence Light Microscopy (Cryo-FLM) of Plunge‐Frozen Grids with Cells
- 01:51Focused Ion Beam (FIB) Milling
- 05:47Correlative Transmission Electron Microscopy (TEM)
- 07:02Results: Visualizing the Endocytic Protein Deposit in the Cell with Cryo‐ET
- 07:38Conclusion
यहां, हम क्रायो-इलेक्ट्रॉन टोमोग्राफी के लिए सेलुलर नमूनों की तैयारी का मार्गदर्शन करने पर 3 डी-कोररिलेटिव केंद्रित आयन बीम मिलिंग के लिए एक पाइपलाइन प्रस्तुत करते हैं। रुचि के फ्लोरोसेंटली टैग किए गए प्रोटीन की 3 डी स्थिति पहले क्रायो-फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी द्वारा निर्धारित की जाती है, और फिर मिलिंग के लिए लक्षित होती है। प्रोटोकॉल स्तनधारी, खमीर और जीवाणु कोशिकाओं के लिए उपयुक्त है।
