Journal
/
/
Подготовка образцов методом 3D-коррелятивного фрезерования сфокусированного ионного пучка для криоэлектронной томографии высокого разрешения
JoVE Journal
Biologia
This content is Free Access.
JoVE Journal Biologia
Sample Preparation by 3D-Correlative Focused Ion Beam Milling for High-Resolution Cryo-Electron Tomography
DOI:

08:20 min

October 25, 2021

, , , ,

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:36Cryo-Fluorescence Light Microscopy (Cryo-FLM) of Plunge‐Frozen Grids with Cells
  • 01:51Focused Ion Beam (FIB) Milling
  • 05:47Correlative Transmission Electron Microscopy (TEM)
  • 07:02Results: Visualizing the Endocytic Protein Deposit in the Cell with Cryo‐ET
  • 07:38Conclusion

Summary

Tadução automática

В данной работе мы представляем конвейер для 3D-коррелятивного фрезерования сфокусированного ионного пучка для подготовки клеточных образцов для криоэлектронной томографии. 3D-положение интересующих флуоресцентно меченых белков сначала определяется с помощью криофлуоресцентной микроскопии, а затем подвергается измельчению. Протокол подходит для клеток млекопитающих, дрожжей и бактерий.

Vídeos Relacionados

Read Article