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인간 세포에서 내인성 인산화 STAT 단백질의 측정을 위한 시간 분해된 Förster 공명 에너지 전달 분석

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Time-resolved Förster Resonance Energy Transfer Assays for Measurement of Endogenous Phosphorylated STAT Proteins in Human Cells

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인간 세포에서 내인성 인산화 STAT 단백질의 측정을 위한 시간 분해된 Förster 공명 에너지 전달 분석

DOI:

10.3791/62915-v

•

07:12 min

•

September 09, 2021

•

Jaime Padros, Geneviève Chatel, Mireille Caron

¹BioAuxilium Research

Capítulos

00:05Introduction
01:02Stimulator or Inhibitor Titration Using the Two-Plate Assay Protocol with Adherent Cells
04:33Results: Two-Plate and One-Plate Detection of STAT Proteins in Adherent and Suspension Cell Lines, and Intraplate Variability Study
06:40Conclusion

Summary

Tadução automática

시간-분해된 Förster 공명 에너지 전달 세포 기반 분석 프로토콜은 384-웰 포맷의 세포 용해물에서 내인성 인산화 신호 변환기 및 전사 활성화제(STAT) 1/3/4/5/6 단백질의 단순하고, 특이적이며, 민감하고, 강력한 정량화를 위해 기술된다.

Tags

Keywords: Time-resolved FRET TR-FRET STAT Proteins JAK/STAT Signaling Immunoassay Cell Culture Cell Stimulation Cell Lysis Phosphatase Inhibitors High-throughput Screening Pharmacological Characterization

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