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Immunofluorescence, clairance et microscopie multiphotonique des ovaires entiers pour l’analyse 3D quantitative de la réserve ovarienne en développement chez la souris
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Biologia do Desenvolvimento
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JoVE Journal Biologia do Desenvolvimento
Whole Ovary Immunofluorescence, Clearing, and Multiphoton Microscopy for Quantitative 3D Analysis of the Developing Ovarian Reserve in Mouse
DOI:

12:36 min

September 03, 2021

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Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 01:00Perfusion, Dissection, and Fixation of Pubertal Ovaries
  • 02:34Whole-Mount Ovary Immunostaining
  • 03:59Clearing of Immunostained Whole-Mount Ovaries
  • 04:54Sample Setup and Imaging with a Multiphoton Microscope
  • 06:54Oocyte Quantification
  • 09:28Results: Quantitative and Qualitative Analysis of the Ovaries Using Immunostaining, Multiphoton Microscopy, and 3D Visualization
  • 11:51Conclusion

Summary

Tadução automática

Nous présentons ici un protocole optimisé pour l’imagerie d’ovaires entiers pour des analyses quantitatives et qualitatives utilisant l’immunocoloration à montage entier, la microscopie multiphotonique et la visualisation et l’analyse 3D. Ce protocole prend en charge un traitement à haut débit, fiable et reproductible applicable à la toxicologie, au diagnostic clinique et aux tests génomiques de la fonction ovarienne.

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