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Biologia do Desenvolvimento
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차세대 염기서열분석을 위한 뮤린 망막 내피 세포의 분리
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Biologia do Desenvolvimento
Isolation of Murine Retinal Endothelial Cells for Next-Generation Sequencing
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차세대 염기서열분석을 위한 뮤린 망막 내피 세포의 분리
DOI:
10.3791/63133-v
•
09:59 min
•
October 11, 2021
•
Nicholas W. Chavkin
2
,
Shelby Cain
,
Kenneth Walsh
3,4
,
Karen K. Hirschi
2,4,5
1
Department of Cell Biology
,
University of Virginia School of Medicine
,
2
Robert M. Berne Cardiovascular Research Center
,
University of Virginia School of Medicine
,
3
Department of Cardiology
,
University of Virginia School of Medicine
,
4
Hematovascular Biology Center
,
University of Virginia School of Medicine
,
5
Yale Cardiovascular Research Center
,
Yale University School of Medicine
Capítulos
00:04
Introduction
00:38
Obtain Mouse Eyes for Retinal Isolation and Isolate Mouse Retinal Tissue
02:30
Digest Retinal Tissue into a Single Cell Suspension and Immunostain the Cells with Antibodies
04:07
Prepare for Fluorescence‐Activated Cell Sorting
05:19
Isolate Viable Endothelial Cells via FACS
07:18
Results: Analysis of Isolated Endothelial Cells and Next‐Generation Sequencing After Isolation
09:03
Conclusion
Summary
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이 프로토콜은 세포 수율, 순도 및 생존성에 최적화된 뮤린 출생후 망막 내피 세포의 단리를 위한 방법을 설명한다. 이 세포는 차세대 시퀀싱 접근법에 적합합니다.
Tags
Retinal Endothelial Cells
Next-generation Sequencing
Vascular Development
Neonatal Mouse
Eye Dissection
Cell Isolation
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