Denne protokol beskriver en iSCAT-baseret billedbehandlings- og enkeltpartikelsporingsmetode, der muliggør samtidig undersøgelse af molekylmassen og den diffusive opførsel af makromolekyler, der interagerer med lipidmembraner. Trinvise instruktioner til prøveforberedelse, masse-til-kontrast-konvertering, filmopkøb og efterbehandling gives sammen med anvisninger for at forhindre potentielle faldgruber.