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Análise de molécula única de motores da família Sf9 superprocessiva superprocessiva cinesina-3
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Capítulos
- 00:05Introduction
- 01:22P0 Virus Stock Generation
- 02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
- 03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
- 04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
- 05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
- 06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
- 07:24Conclusion
Este estudo detalha a purificação do KIF1A(1-393LZ), membro da família das cinesinas-3, utilizando o sistema de expressão do Sf9-baculovírus. A análise in vitro de deslizamento de molécula única e multimotor desses motores purificados exibiu propriedades de motilidade robustas comparáveis aos motores do lisado de células de mamíferos. Assim, o sistema Sf9-baculovírus é passível de expressar e purificar a proteína motora de interesse.
