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Métodos in vitro ascendentes para evaluar la organización ultraestructural, la remodelación de la membrana y el comportamiento de sensibilidad a la curvatura de las septinas
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Bottom-Up In Vitro Methods to Assay the Ultrastructural Organization, Membrane Reshaping, and Curvature Sensitivity Behavior of Septins
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Métodos in vitro ascendentes para evaluar la organización ultraestructural, la remodelación de la membrana y el comportamiento de sensibilidad a la curvatura de las septinas

DOI:
10.3791/63889-v

•

09:09 min

•

August 17, 2022

•

, , , , , , , , , , ,
1Laboratoire Physico Chimie Curie, Institut Curie, PSL Research University,Sorbonne Université, 2Institut Fresnel, CNRS UMR7249,Aix Marseille Univ, Centrale Marseille, 3Department of Bionanoscience, Kavli Institute of Nanoscience Delft,Delft University of Technology, 4Department of Chemical Engineering,Imperial College London, 5Sorbonne Université, CNRS, Institut de Biologie Paris-Seine (IBPS),Service de microscopie électronique (IBPS-SME), 6Laboratoire Matière et Systèmes Complexes (MSC),Université Paris Cité, 7Institute of Biotechnology,Czech Academy of Sciences, BIOCEV

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:49Designing Wavy NOA (Norland Optical Adhesive) Replica from Wavy PDMS (Polydimethylsiloxane) Patterns
  • 01:49Generation of a Supported Lipid Bilayer and Protein Incubation
  • 03:22Sample Fixation, Sample Dehydration, Critical Point Drying
  • 04:43Sample Mounting and Coating
  • 05:54Acquire the Images Using a Field-Emission SEM (FE-SEM) Microscope
  • 06:56Results: Analysis of the Self-Assembly of Septins at the Lipid Membrane
  • 08:27Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Las septinas son proteínas citoesqueléticas. Interactúan con las membranas lipídicas y pueden sentir, pero también generar curvatura de la membrana a escala de micras. Describimos en este protocolo metodologías in vitro ascendentes para analizar deformaciones de membrana, unión de septina sensible a la curvatura y ultraestructura de filamentos de septina.

Tags

In Vitro MethodsUltrastructural OrganizationMembrane ReshapingCurvature SensitivitySeptinsCytoskeletal FilamentsNorland Optical AdhesivePolydimethylsiloxaneSupported Lipid BilayerScanning Electron Microscopy

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