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Coleta remota de dados de tomografia crio-elétron e média de subtomograma
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JoVE Journal Biologia
Cryo-Electron Tomography Remote Data Collection and Subtomogram Averaging

Coleta remota de dados de tomografia crio-elétron e média de subtomograma

DOI:
10.3791/63923-v

•

08:55 min

•

July 12, 2022

•

, , ,
1Electron Bio-Imaging Centre,Diamond Light Source Ltd, Harwell Science & Innovation Campus, 2Division of Structural Biology, Wellcome Trust Centre for Human Genetics,University of Oxford, 3Chinese Academy of Medical Sciences Oxford Institute,University of Oxford

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:30Remote Cryo‐Electron Tomography (ET) Data Acquisition Using Tomo5
  • 04:31Cryo‐ET Subtomogram Averaging of Apoferritin Using emClarity
  • 07:45Results: High‐Resolution Cryo‐Electron Tomography Remote Data Acquisition
  • 08:27Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

O presente protocolo descreve a aquisição remota de dados remotos crio-elétrons de alta resolução usando Tomo5 e processamento de dados subsequente e média de subtomogramas usando a emClarity. A apoferritina é usada como exemplo para ilustrar processos passo a passo detalhados para alcançar uma estrutura crio-ET com resolução de 2,86 Å.

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Keywords: Cryo-electron TomographyRemote Data CollectionSubtomogram AveragingCROWETMicromoleculesNative Cellular EnvironmentTomo Five SoftwareImage Acquisition ParametersAtlasScreeningTarget SetupImage Shift CalibrationEucentric Height AdjustmentLow Dose Tomography Setup

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