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क्रायो-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी संरचनात्मक निर्धारण के लिए डीएनए मरम्मत कारकों के साथ जटिल न्यूक्लियोसोम कोर कणों की तैयारी

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Preparation of Nucleosome Core Particles Complexed with DNA Repair Factors for Cryo-Electron Microscopy Structural Determination

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क्रायो-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी संरचनात्मक निर्धारण के लिए डीएनए मरम्मत कारकों के साथ जटिल न्यूक्लियोसोम कोर कणों की तैयारी

DOI:

10.3791/64061-v

•

07:59 min

•

August 17, 2022

•

Yesenia Rodriguez, Kevin John Butay*¹, Kedar Sharma*¹, Elizabeth Viverette*¹, Samuel H. Wilson

¹Genome Integrity and Structural Biology Laboratory,National Institute of Environmental Health Sciences, National Institutes of Health

Capítulos

00:04Introduction
00:58Preparation of NCP-DNA Repair Factor Complex
02:31Freezing Nucleosomal Complex
04:25Screen Grids
06:02Results: Preparation of Nucleosomal Complexes Using Frozen TEM Grids
07:20Conclusion

Summary

Tadução automática

यह प्रोटोकॉल फ्रीजिंग टीईएम ग्रिड के लिए नमूना तैयारी के दो तरीकों का उपयोग करके न्यूक्लियोसोमल कॉम्प्लेक्स की तैयारी को विस्तार से रेखांकित करता है।

Tags

Nucleosome DNA Repair Cryo-electron Microscopy Sample Preparation Cross-linking Size Exclusion Chromatography Buffer Exchange Protein Complex

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