Journal
/
Genética
/
Udvikling af knock-out muskelcellelinjer ved hjælp af Lentivirus-medieret CRISPR / Cas9 genredigering
JoVE Journal
Genética
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Genética
Development of Knock-Out Muscle Cell Lines using Lentivirus-Mediated CRISPR/Cas9 Gene Editing

Udvikling af knock-out muskelcellelinjer ved hjælp af Lentivirus-medieret CRISPR / Cas9 genredigering

DOI:
10.3791/64114-v

•

10:12 min

•

June 16, 2022

•

, , , , , ,
1University Grenoble Alpes, INSERM, U1216, CHU Grenoble Alpes, Grenoble Institut Neurosciences, 2Genome Center,University of California, Davis

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:43CRISPR Guide Design
  • 02:03Plasmid Cloning
  • 03:43Lentivirus Production
  • 06:28Myoblast Transduction
  • 07:20Functional Characterization of Edited Clones
  • 08:53Results: Development of RYR1-Knock Out Human Muscle Cell Line
  • 09:42Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Protokollen beskriver, hvordan man genererer knock-out myoblaster ved hjælp af CRISPR/Cas9, startende fra design af guide-RNA'er til den cellulære kloning og karakterisering af knock-out klonerne.

Tags

CRISPR/Cas9Gene EditingKnock-outMuscle CellsLentivirusIPS CellsGuide RNAPCRAgarose GelRestriction EnzymesPlasmid Cloning

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

QTL Mapping og CRISPR / Cas9 redigering for at identificere et lægemiddelresistensgen i<em> Toxoplasma gondii</em

Udvælgelsesafhængig og uafhængig generering af CRISPR / Cas9-medierede Gene Knockouts i Pattedyrceller

En standardmetode til at undersøge ejendommen mutagenicitet som en funktion af punkt Mutation reparation katalyseret af CRISPR/Cas9 og SsODN i humane celler

Mikroinjektion af CRISPR/Cas9 Protein i kanal havkat, Ictalurus punctatus, embryoner til Gene Editing

Højeffektive gen afbrydelse af Murine og menneskelige hæmatopoietisk stamceller ved CRISPR/Cas9

CRISPR/Cas9 gen redigering at gøre betinget mutanter af menneskelige Malaria parasitten, P. falciparum

Endogene Protein Tagging i menneskelige induceret pluripotente stamceller ved hjælp af CRISPR/Cas9

Genom-redigering i pattedyr cellelinjer ved hjælp af CRISPR-Cas

CRISPR/Cas9 ribonucleoprotein-medieret præcis Genredigering ved Rørelektroporation

Introduktion af et gen knockout direkte i den Amastigote fase af Trypanosoma cruzi ved hjælp af Crispr/Cas9 system

Read Article