Detection of Homologous Recombination Intermediates via Proximity Ligation and Quantitative PCR in Saccharomyces cerevisiae

Diedre Reitz; J&#233;r&#244;me Savocco; Aur&#232;le Piazza; Wolf-Dietrich Heyer

doi:10.3791/64240

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सैक्रोमाइसेस सेरेविसिया में प्रॉक्सिमिटी लिगेशन और क्वांटिटेटिव पीसीआर के माध्यम से होमोलोगस रिकॉम्बिनेशन इंटरमीडिएट्स का पता लगाना

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Detection of Homologous Recombination Intermediates via Proximity Ligation and Quantitative PCR in Saccharomyces cerevisiae

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सैक्रोमाइसेस सेरेविसिया में प्रॉक्सिमिटी लिगेशन और क्वांटिटेटिव पीसीआर के माध्यम से होमोलोगस रिकॉम्बिनेशन इंटरमीडिएट्स का पता लगाना

DOI:

10.3791/64240-v

•

07:55 min

•

September 11, 2022

•

Diedre Reitz, Jérôme Savocco, Aurèle Piazza, Wolf-Dietrich Heyer³

¹Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, Davis, ²Laboratory of Biology & Modeling of the Cell,École Normale Supérieure de Lyon, ³Department of Molecular & Cellular Biology,University of California, Davis

Capítulos

00:05Introduction
00:50DLC Assay
01:54Cell Spheroplasting, Lysis, and Restriction Site Restoration
03:19Restriction Enzyme Digest and Intramolecular Ligation
05:15Results: DLC and DLE Assay Analysis of D-Loops After DSB Induction
07:02Conclusion

Summary

Tadução automática

डी-लूप कैप्चर (डीएलसी) और डी-लूप एक्सटेंशन (डीएलई) परख मात्रात्मक पीसीआर के साथ निकटता बंधाव के सिद्धांत का उपयोग करते हैं ताकि डी-लूप गठन, डी-लूप एक्सटेंशन और सैक्रोमाइसेस सेरेविसिया में एक इंड्यूसेबल डबल-स्ट्रैंडेड ब्रेक की साइट पर उत्पाद गठन की मात्रा निर्धारित की जा सके।

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