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글루칸 포스파타제의 기질 결합을 측정하기 위한 Concanavalin A 기반 침강 분석

JoVE Journal
Bioquímica

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Concanavalin A-Based Sedimentation Assay to Measure Substrate Binding of Glucan Phosphatases

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글루칸 포스파타제의 기질 결합을 측정하기 위한 Concanavalin A 기반 침강 분석

DOI:

10.3791/64700-v

•

09:07 min

•

December 23, 2022

•

Eliana M. Wolpaw*¹, Marissa L. Frenett*¹, Claudia A. Mak, Sloane M. Zwanger, Madushi Raththagala

¹Department of Chemistry,Skidmore College

Capítulos

00:04Introduction
01:03Preparation of ConA‐Sepharose Beads and ConA‐Sepharose: Amylopectin Beads
02:19Starch Excess4 (SEX4) Protein Binding with ConA‐Sepharose: Amylopectin Beads
03:41Running SDS‐PAGE Gels
04:27Western Blotting for Chemiluminescence Detection and Data Analysis
06:28Results: Binding Affinity of SEX4 to ConA‐Sepharose‐Amylopectin Beads
08:18Conclusion

Summary

Tadução automática

이 방법은 글루칸 포스파타제와 아밀로펙틴의 결합 친화도를 정량화하기 위한 렉틴 기반 시험관 내 침강 분석을 설명합니다. 이 공동 침강 분석은 글루칸 포스파타제 기질 결합을 측정하는 데 신뢰할 수 있으며 다양한 가용화된 글루칸 기질에 적용할 수 있습니다.

Tags

Concanavalin A Sedimentation Assay Glucan Phosphatases Substrate Binding Carbohydrate-protein Interactions SEX4 Mutants Amylopectin Binding Buffer Centrifugation Protease Inhibitor

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