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Studio della biologia e del metabolismo dei grassi beige utilizzando il sistema di attivazione CRISPR SunTag-p65-HSF1
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Investigation of Beige Fat Biology and Metabolism Using the CRISPR SunTag-p65-HSF1 Activation System
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Studio della biologia e del metabolismo dei grassi beige utilizzando il sistema di attivazione CRISPR SunTag-p65-HSF1

DOI:
10.3791/64849-v

•

09:52 min

•

January 06, 2023

•

, ,
1Obesity and Comorbidities Research Center,State University of Campinas, 2Department of Structural and Functional Biology, Institute of Biology,State University of Campinas

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:53Molecular Cloning
  • 04:34In Vivo Injection of Adeno-Associated Virus (AAV) into the Inguinal White Adipose Tissue (iWAT)
  • 06:14In Vitro Differentiation of Stromal Vascular Cells (SVFs) into Beige Adipocytes
  • 07:23In Vitro AAV Infection of SVFs
  • 08:11Results: SPH-Induced Expression of Endogenous Prdm16 for Enhanced Oxygen Consumption
  • 09:23Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Questo protocollo presenta l'uso di CRISPR SunTag-p65-HSF1 (SPH) negli adipociti (AdipoSPH) come strategia alternativa al virus adeno-associato (AAV) per studiare la biologia del grasso beige. L'iniezione in vivo di sgRNA portatori di AAV mirati al gene endogeno Prdm16 è sufficiente per indurre lo sviluppo di grasso beige e migliorare il programma genico termogenico.

Tags

CRISPRSunTagP65-HSF1Activation SystemAdipocytesGain-of-functionAdeno-associated VirusPRDM16SgRNACloningVirus Production

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