/

/

짧은 비오티닐화 RNA를 사용한 RNA 결합 단백질의 최적화된 정량적 풀다운 분석

JoVE Journal
Bioquímica

This content is Free Access.

JoVE Journal Bioquímica

An Optimized Quantitative Pull-Down Analysis of RNA-Binding Proteins Using Short Biotinylated RNA

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

짧은 비오티닐화 RNA를 사용한 RNA 결합 단백질의 최적화된 정량적 풀다운 분석

DOI:

10.3791/64923-v

•

07:55 min

•

February 17, 2023

•

Núria Crua Asensio, Stefano Rizzieri, Alessandro Cuomo, Gian Gaetano Tartaglia³, Elsa Zacco

¹Center for Human Technology,Italian Institute of Technology (IIT), ²Department of Experimental Oncology,European Institute of Oncology (IEO), ³Department of Biology and Biotechnologies ‘Charles Darwin’,Sapienza University of Rome

Capítulos

00:05Introduction
00:42Total Protein Harvest and Protein Concentration Determination
01:48Bead Preparation
03:12Bead Loading and Protein Binding on Beads
04:13Washing of Nonspecific Binders
04:53Elution of Specific Binders
05:39Results: Quantification and Validation of Protein Interactors of Specific RNA Sequences
07:24Conclusion

Summary

Tadução automática

여기에서 우리는 인간 세포의 총 단백질 추출물, 비오티닐화 RNA로 코팅된 스트렙타비딘 비드 및 질량 분석 분석을 사용하여 특정 RNA 서열의 단백질 상호작용자를 발견, 정량화 및 검증하기 위한 최적화된 시험관 내 방법을 제시합니다.

Tags

Keywords: RNA-binding Proteins Pull-down Analysis Biotinylated RNA Protein Complexes HEK 293T Cells Lysis Buffer Magnetic Beads Yeast TRNA RNA Oligonucleotide

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

작은 RNA 정량 비는 코딩을위한 고밀도 지방 단백질의 분리

적외선 형광 염료로 표지 올리고 뉴클레오티드를 사용하여 전기 영동 이동성 시프트 분석을위한 최적화 된 프로토콜

양 사체 (Transcriptome) 분석에있는 사용을위한 씨앗에서 매우 정제 된 RNA의 분리를위한 효율적인 방법

Biotinylated 세포 표면 단백질의 정제<em> Rhipicephalus microplus</em> 상피 직감 세포

인간 승모판에서 단백질 추출을위한 최적화 된 프로토콜

질량 분석 기반 식별 RNA 바인딩 영역에 대 한 샘플 준비

캡처 클릭 화학 기반 RNA 위하여를 사용 하 여 RNA 의무적인 단백질의 포착 (CARIC) 전략

PeptiQuick, 간소화 된 단백질 결합 검정을 위한 생체 면역 펩티디스크에 막 단백질의 한 단계 통합

병렬 반응 모니터링에 의한 유비퀴틴 연쇄 분석

성숙한 쌀의 횡단 단면(오리자 사티 라 L.) 파이펫 팁을 사용하여 전자 현미경 이미징을 스캐닝하기 위한 커널

Read Article