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TIRF(Total Internal Reflection Fluorescence) 현미경을 사용한 지질 이중층의 측면 이동성 및 이온 채널 활성에 대한 단일 분자 이미징

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Single-Molecule Imaging of Lateral Mobility and Ion Channel Activity in Lipid Bilayers using Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy

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TIRF(Total Internal Reflection Fluorescence) 현미경을 사용한 지질 이중층의 측면 이동성 및 이온 채널 활성에 대한 단일 분자 이미징

DOI:

10.3791/64970-v

•

08:55 min

•

February 17, 2023

•

Shuo Wang, Stephan Nussberger

¹Biophysics Department, Institute of Biomaterials and Biomolecular Systems,University of Stuttgart

Capítulos

00:05Introduction
00:43Preparation of Lipids and Agarose Hydrogel
01:33PMMA Chamber Assembly and Lipid Monolayer Formation
03:06Preparation of Lipid-Coated Aqueous Droplets in Hexadecane/Silicone Oil Solution
04:17Preparation and Imaging of Single Ion Channels in DIB Membranes
06:49Results: Isolation of TOM-CC and Correlation of Channel Activity with Lateral Mobility of TOM-CC
08:18Conclusion

Summary

Tadução automática

이 프로토콜은 TIRF 현미경을 사용하여 개별 이온 채널을 추적하고 지지된 지질막에서 그 활성을 결정하여 측면 막 이동과 채널 기능 간의 상호 작용을 정의하는 방법을 설명합니다. 멤브레인을 준비하고, 데이터를 기록하고, 결과를 분석하는 방법을 설명합니다.

Tags

Single-molecule Imaging Lateral Mobility Ion Channel Activity Lipid Bilayers Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy Membrane Proteins DPhPC Hexadecane Silicone Oil Agarose Hydrogel PMMA Chamber

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