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Geração de camundongos knockout específicos para gordura marrom usando um sistema combinado de RNA guia único Cre-LoxP, CRISPR-Cas9 e vírus adenoassociado

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Generation of Brown Fat-Specific Knockout Mice Using a Combined Cre-LoxP, CRISPR-Cas9, and Adeno-Associated Virus Single-Guide RNA System

Geração de camundongos knockout específicos para gordura marrom usando um sistema combinado de RNA guia único Cre-LoxP, CRISPR-Cas9 e vírus adenoassociado

DOI:

10.3791/65083-v

•

03:58 min

•

March 24, 2023

•

Tadataka Tsuji, Yang Zhang, Yu-Hua Tseng

¹Section on Integrative Physiology and Metabolism, Research Division, Joslin Diabetes Center,Harvard Medical School

Capítulos

00:04Introduction
00:55Surgery for Adeno‐Associated Virus (AAV) Injection into the Brown Adipose Tissue (BAT) in Mice
02:41Results: Identifying the Potential Flaws Leading to Unsuccessful Injection
03:18Conclusion

Summary

Tadução automática

Neste protocolo, descrevemos os procedimentos técnicos para gerar camundongos knockout específicos para tecido adiposo marrom (BAT) utilizando um sistema combinado de RNA guia único (sgRNA) Cre-LoxP, CRISPR-Cas9 e vírus adenoassociado (AAV). As etapas descritas incluem o planejamento dos sgRNAs, a preparação das partículas de AAV-sgRNA e a microinjeção de AAV nos lóbulos BAT.

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