์๋ฐํ ํจ๊ณผ์ ์ดํด๋ ํํฉ๋ฌผ์ ์ฉํด์ ์ฐ๋ ์ฌ์ด์ ๊ด๊ณ๋ฅผ ํฉ๋ฆฌํํ๋ ๋ฐ ๋์์ด๋ฉ๋๋ค. ๋ํ, ์ด๋ ๋ํ ์์ดํ pK ๊ฐ์ ๊ฐ์ง ํํฉ๋ฌผ์ ๋ํ ์ปจ์ฅฌ๊ฒ์ดํธ ์ผ๊ธฐ์ ์๋์ ์์ ์ฑ์ ์ค๋ช ํ๋ค. ์ด ๋จ์์์๋ ์ฌ์ธต์ ์ธ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ค๋ช ํ๋ ์๋ฆฌ๋ฅผ ์์ธํ ์ค๋ช ํฉ๋๋ค. ์ฐ์ ๊ฐ๋์ ํด๋น ์ปจ์ฅฌ๊ฒ์ดํธ ์ผ๊ธฐ์ ์์ ์ฑ์ pK๊ฐ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๊ฒฐ์ ๋๋ค. ์ด ๊ด์ฐฐ๋ ๊ด๊ณ๋ ์ฉ์กด์ด์จ๊ณผ ์ฉ๋งค ๋ถ์ ์ฌ์ด์ ์ํธ ์์ฉ์ธ ์ฉํด์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋๋ค. ์ด ๊ณผ์ ์์ ์ฉ๋งค ๋ถ์๋ ์ด์จ์ ๋๋ฌ์ธ๊ณ ์์ ํํฉ๋๋ค.
์ฉ์กด ์ด์จ์ ์ฉํด๋ ์ธ ๊ฐ์ง ์ ํ์ผ๋ก ๋ถ๋ฅ๋ ์ ์๋ค: (i) ๊ธฐ์ฆ์ ์ํธ ์์ฉ, (ii) ์ ํ-์ดํด ์ํธ ์์ฉ, (iii) ์์ ๊ฒฐํฉ ์ํธ ์์ฉ. ๊ธฐ์ฆ์ ์ํธ ์์ฉ์์ ์ฉ๋งค๋ ๊ณต์ ๋์ง ์์ ์ ์ ์์ ์ฉ์กด ์ด์จ์ ๊ธฐ๋ถํฉ๋๋ค. ์ฉ๋งค๋ ๋ฃจ์ด์ค ๊ธฐ์ง์ญํ ์ ํ๋ฉฐ ์ด์จ์ ๋ฃจ์ด์ค์ฐ์ญํ ์ ํ๋ค. ๋ ๋ฒ์งธ ์ ํ์์๋, ์ ํ-์ดํด ์ํธ ์์ฉ์ ๊ทน์ง ์ฉ๋งค์์ ๊ด์ฐฐ๋๋ฉฐ, ์ฌ๊ธฐ์ ๊ทธ๋ค์ ๋คํด ๋ชจ๋ฉํธ๋ ์ถฉ์ ๋ ์ด์จ๊ณผ ์ํธ ์์ฉํ ์ ์์ต๋๋ค. ์ด๊ฒ์ ์ด์จ์ ์์ ํ์ ์ผ์นํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์ฉ๋งค ๋ถ์์ ์๋ ์์์ฑ ๋ถ๋ถ ์ ํ๋ฅผ ์ฌ๋ฐฐ์ดํ๋ ๊ด๋ จ์ํต๋๋ค, ๋ฐ๋ผ์ ์ด์จ์ ์์ ํํฉ๋๋ค. ์๋ฅผ ๋ค์ด, ์ํ์ฌ์ ์ฉํด์์ ์ธ๊ธํ๋ฏ์ด, ๊ณต์ฃผ ์ผ๊ธฐ์ธ ์์ฐํ์ง์ ์ ๋๋ฉ์ด์ ์ ์ฉ๋งค์ ์ดํด์ ์์ฑ ์ค์ฌ์ผ๋ก ์ํด ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์์ ํ๋๋ค. ๋ง์ง๋ง์ผ๋ก, ์ฉ๋งค ๋ถ์์ ์ฉ์กด์ด ์ด์จ ์ฌ์ด์ ์์ ๊ฒฐํฉ์ ์ํด ์ด์จ์ด ์์ ํ๋๋ฉด ์ํธ์์ฉ์ ์์ ๊ฒฐํฉ ์ํธ์์ฉ์ด๋ผ๊ณ ํ๋ค.
์ฉ์กด ์ด์จ๊ณผ ์ฉ๋งค ๋ถ์ ์ฌ์ด์ ์ํธ ์์ฉ์ ์ฐ๋์ ๊ฐ๋์ ์ง์ ๋น๋กํ๋ ์์ ์ฑ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์นฉ๋๋ค.ย ๋ฐ๋ผ์, ์ด๋ฌํ ์ด์จ์ ์์ ์ฑ์ ๋ ๋ง์ ์ฉ๋งค ๋ถ์์ ์ํด ํฌ์๋ ๋ ๋ ๋ง์ ์์ ์ํธ ์์ฉ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํฉ๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ์ฉํด ํ๋ ๋์, ๋ถ์์ ๋ถํผ๊ฐ ํฐ ๋์ฒด์์ steric ๋ฐฉํด๋ ์ค์ ํ ์ญํ ์ ํ๋ค. ๋ถํผ๊ฐ ์ ์ ๋จ์ ๊ฐ์ง ํํฉ๋ฌผ์ ์ฉ๋งค ๋ถ์์ ๋ ๋ง์ ์ํธ ์์ฉ์ ํ์ฉํ๋, ๋ฐฉํด๋ฐ์ง ์์ต๋๋ค.
๋์กฐ์ ์ผ๋ก, ๋ถํผ๊ฐ ํฐ ๊ทธ๋ฃน์ ์์ ํ๋ ํํฉ๋ฌผ์ steric ๋ฐฉํด ํ ๊ณ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ ๋๋ก ์๋ฐ๋. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋ฐฉํด๋ฐ์ง ์๋ ์ด์จ์ ๋ ๊ฐํ ์์ ์ฑ์ ๋ณด์ฌ ์ค๋๋ค. ์ด๋ ์ํ์ฌ, ์ด์ํ๋กํ์ฌ ๋ฐ ํ ๋ฅดํธ ๋ถํ๋์ ์ฐ๋๋ฅผ ๋น๊ตํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ ์ฆ๋๋ค. ๋์ฒด๋ฌผ์ ํฌ๊ธฐ๊ฐ ์ฆ๊ฐํจ์ ๋ฐ๋ผ ์ด๋ค ํํฉ๋ฌผ๊ฐ๊ฐ์ ํด๋น ์ปจ์ฅฌ๊ฒ์ดํธ ๋ฒ ์ด์ค๋ ๋ ๋ง์ ์คํ ์ธํธ ์ฅ์ ๋ฌผ์ด ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ๊ทธ๊ฒ์ ๋ ์๋ ๋ฐ์ธ. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ, ์ด์ํ๋กํ์ฌ์ ์ํ์ฌ(pKa=16.00)๋ณด๋ค ์ฝํ ์ฐ(pKa=17.10) ๋ฐ ํ ๋ฅดํธ-๋ถํ๋(pKa=19.20)์ ์ด์ํ๋กํ์ฌ(p Ka=17.10)๋ณด๋ค์ฝํ ์ฐ์ด๋ค. ์์ฝ์์, ์ปจ์ฅฌ๊ฒ์ดํธ ๋ฒ ์ด์ค ์์ด์จ์ ์คํ ์ธ ์ฅ์ ๋ฌผ์ ์ฉํด์ ๋๋ฅผ ์ ์ํฉ๋๋ค. ๋ฎ์ ์ฉํด๋ ํด๋น ์ฐ์ ์ฝํ๊ฒ ์ฉํด ๋ ์ด์จ์ ๋ถ์์ ์ ์ด๋๋ค.