الحث العصبي هو الخطوة الأولى في تكوين الدماغ. وهو الآلية التي عقدة هنسن (المنظم) ، يرشد النسيج المجاور لاعتماد مصير العصبية ، أي أن تثير الجهاز العصبي. هذا الفيديو يوضح مقايسة لتحريض العصبي في الأجنة الفرخ.
Abstract
الجنين الفرخ هو أداة قيمة في دراسة التطور الجنيني المبكر. شفافيته ، وسهولة الوصول وسهولة التلاعب ، وجعلها أداة مثالية لدراسة تشكيل والزخرفة الأولية للنظام العصبي. هذا الفيديو يوضح كيفية نسيج منظم الكسب غير المشروع إلى المضيف ، والطريقة التي يتم المطعمة عقدة هنسن ق (المنظم في جنين الفرخ) إلى الأديم الظاهر المضيف المختصة. الكسب غير المشروع منظم يرشد المغطي غ لقد الأنسجة لاعتماد مصير العصبية عبر إشارات العصبية المحفزة. ويشار إلى هذه الآلية والحث العصبي ، ويشكل الخطوة الأولى في تكوين الدماغ والحبل الشوكي في amniotes. ويستخدم هذا الأسلوب أساسا لتوصيف جزيئات المفترضة تحريض العصبي في الفرخ. هذا الفيديو يوضح الخطوات المختلفة في مقايسة لتحريض العصبي ؛ أولا ، explanted الجنين donnor ويعلق على طبق. ثم ، على استعداد الجنين المضيف للثقافة الجديدة. والكسب غير المشروع ورفعه إلى الهامش زرع المنطقة الشفافة المضيف. هو مثقف المضيف 18-22 ساعة. تم إصلاح التجمع وتجهيزها لتطبيقات أخرى (مثل التهجين في الموقع). ولقد ابتكر هذا الأسلوب أصلا بواسطة ادينغتون<sup> 1،2</sup> وGallera<sup> 3،4</sup>.
Protocol
أولا تخطيطي لمحة عامة : هذا الفيديو يوضح الخطوات المختلفة في مقايسة لتحريض العصبي في الأجنة الفرخ. الأول ، هو explanted الجنين المضيف ف…
Discussion
هذا الفيديو يوضح الخطوات المختلفة في إجراء عملية فحص لتحريض العصبي ، ويستخدم هذا الاختبار أساسا لتوصيف جزيئات المفترضة تحريض العصبي في الفرخ ، وبالتالي يمكن استخدامه لمجموعة متنوعة واسعة من التطبيقات ، بدءا من micromanipulations الجنينى 1-4 ؛ 6 إلى شلالات جديدة كشف إشار…
Acknowledgements
موانئ دبي هي المستفيدة من جائزة روث 1F32 – 01A1 كيرشتاين DA021977 من المعهد الوطني لتعاطي المخدرات. وأيد هذا العمل من قبل مؤسسة مارغريت Alkek M. إلى RHF.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Eggs
Animal
Charles River Laboratories
Premium Fertile
Fertilized, HH3+ (14 hr)
Stereomicroscope
Microscope
Leica Microsystems
MZ9.5 or similar
Hybridization Incubator
Equipment
Robbins Scientific
M1000
Use with inverted Pyrex dish and 500 ml ddH2O beaker
Marsh Automatic Incubator
Equipment
Lyon
RX
Pyrex dish
Watchmaker’s glass 50mm
Tool
VWR
66112-060
Glass rings
Tool
Physical Plant facility
cut 4 mm thick sections of glass tubing (27 mm outer diam, 25 mm inner diam). Do not fine polish.
Curved Forceps (1)
Tool
Electron Microscopy Sciences
72991-4C
Forceps (2)
Tool
Fine Science Tools
11002-13
blunt ended using sharpening Stone and 100ul mineral oil