Neurocircuit analyser för epileptiska anfall Mutationsformer av Drosophila</em
Summary
Använda högfrekvent elektrisk stimulering, beslag-liknande aktivitet kan induceras i<em> Drosophila</em>. Denna verksamhet är lätt registreras från den gigantiska fiber systemet.
Abstract
Drosophila melanogaster är ett användbart verktyg för att studera beslag liknande aktivitet. En mängd olika mutanter där anfall kan framkallas antingen genom stötar eller elektrisk stimulering är tillgänglig för studier av olika aspekter av krampanfall och beteende. Alla flugor, inklusive vilda-typ, kommer att genomgå beslag-liknande aktivitet om stimuleras på en tillräckligt hög spänning. Beslag liknande aktivitet är en allt-eller-inget svar och varje genotyp har en specifik kramptröskeln. Kramptröskeln av en specifik genotyp av fluga kan ändras antingen genom behandling med ett läkemedel eller av genetiska undertryckande eller tillbehör. Tröskeln är lätt att mäta med elektrofysiologi. Beslag-liknande aktivitet kan induceras via högfrekvent elektrisk stimulering levereras direkt till hjärnan och spelas in via rygg längsgående musklerna (DLMS) i bröstkorgen. Den DLMS är innerveras av en del av den gigantiska fiber systemet. Från och med låg spänning, hög frekvens stimulans, och därefter höja spänningen i små steg, kan kramptröskeln för en enda fluga mätas.
Protocol
Discussion
Denna video har visat de grundläggande stegen för att bestämma kramptröskeln en enskild Drosophila flyga. Istället för att använda den digitala oscilloskop, kan ett datoriserat digitizer också användas. Denna teknik är användbar för att bedöma effekterna av en drog eller genetisk förändring på kramptröskeln av en fluga.
Acknowledgements
Detta arbete stöddes av en NIH forskningsanslag, ett Epilepsi Foundation och en McKnight Foundation till MT Försök på Drosophila bananflugor har utförts i enlighet med de riktlinjer och regler som anges av UC Berkeley Animal Använd kommittén.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Digital oscilloscope | Hitachi | VC-6523 | ||
| Stimulator | Cornerstone | S-900 | ||
| Preamplifier | World Precision Instruments | Electro 705 | ||
| Micromanipulators | Narishige | various |
References
- Kuebler, D., Tanouye, M. A. Modifications of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 83, 998-1009 (2000).
- Kuebler, D., Zhang, H., Ren, X., Tanouye, M. A. Genetic suppression of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 86, 1211-1225 (2001).
- Song, J., Tanouye, M. A. Seizure suppression by shakB2, a gap junction mutation in Drosophila. J Neurophysiol. 95, 627-635 (2006).
