, Yüksek kalite ve insan adacıklar uygun miktarda sağlamak başarılı bir adacık nakli için önemli önkoşullar biridir. Bu video, adım adım tarif insan pankreas adacık izolasyonu için prosedürler: değiştirilmiş bir otomatik yöntemi kullanılarak (bölüm I sindirim ve pankreas dokusu toplanması).
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
İnsan Pankreas Adacık İzolasyonu: Bölüm I: Sindirim ve Pankreas Doku Koleksiyon
Bu makalede
Özet
Özet
Tip 1 diyabet Yönetimi, yıl içinde 100 milyar dolar maliyet, hem birey ve toplum, külfetli. Glikoz izleme ve yeni insülin formülasyonları yaygın kullanımına rağmen birçok kişi hala yıkıcı ikincil komplikasyonlar gelişir. Pankreas adacık nakli, diyabetik hastalarda normal glukoz kontrolü yakın geri yükleyebilirsiniz
Protokol
1. Tesis kurulum
- İnsan adacık izolasyonu, takım çalışması gerektirir bir zaman hassas bir işlemdir ve bu nedenle, dört kişi bu işlemi yapmak için ihtiyaç vardır. Takım masaya ve pankreas cannulates cerrah tarafından yönetilmektedir.
- Adacık izolasyon ekibi UIC adacık izolasyonu tesisi girer dakika başlar. Ekip üyeleri, santrifüj gibi, gerekli tüm enstrümantasyon, kontrol edilir ve açık olduğunu emin olun. Ayrıca, tüm davlumbaz ve yüzeyleri sterilize etmek için emin olun.
- İki kişi kanülasyon tablo, sulu kar makinesi, sindirim devre, perfüzyon ünitesi, COBE arıtma makine ve cerrahi masaları kuracak.
- Aynı zamanda, diğer iki ekip ü....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Izolasyon sonucu 9,10 etkileyen çeşitli faktörler vardır. Bunların arasında, pankreas dokusu sindirim önemli bir rol oynar. Kendi insan adacık izolasyon deneyimine dayanarak, potansiyel adacık verim ve kaliteyi etkileyebilecek kritik noktaları, aşağıda özetlenmiştir.
- Enzimlerin farklı türleri kullanılmaktadır sindirim süresi farklı.
- En kısa sürede% 40-50 olarak asiner doku tamamen ayrılmış adacıklar, sindirim seyreltme çözüm ekleyerek ve doku soğuma derhal durdurulması olmalıdır.
- Doku Na.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Teşekkürler
University of Illinois at Chicago gibi Adacık Hücre Kaynak Merkezi NIH hibe (RFA-RR 05-003), Christopher Vakfı, Efroymson Vakfı ve Tellabs Vakfı fon tarafından desteklenir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar | |
|---|---|---|---|---|
| Buz Karı Makinesi | ekipman | Taylor Company | K4036546 | steril buz hazırlamak |
| Santrifüj | ekipman | Beckman Coulter Inc. | 424803 | |
| MZ6 Evirt Inverted Mikroskopi TLBD4.1 | ekipman | Leica Microsystems | 4103 | |
| 2 mm Izgaralı Hücre Kültür Kabı | ekipman | Nalge Nunc international | 174926 | adacık sayımı |
| Dijital Benmari EX7 | ekipman | NesLab | 105361058 | |
| Termometre | ekipman | IBI:IR | 60444 | |
| MonoBloc Terazi AB 104-S | ekipman | Mettler Toledo | 1119430864 | pankreas ağırlığını ölçmek |
| MasterFlex II Hız Kontrol Cihazı | ekipman | Cole-Parmer | J00006445 | digesyon sırasında akış hızını ayarlamak |
| Dijital Sight DS L1 | ekipman | Nikon Instruments | 217267 | |
| Perfüzyon Ünitesi | ekipman | Özel Yapım | n/a | |
| Perfüzyon ünitesi için soğutucu | ekipman | Fisher Scientific | 3013P | |
| Ricordi Odacığı | ekipman | University of Miami | n/a | |
| RPMI dilüsyon solüsyonu | reaktif | Mediatech, Inc. | 99783024 | |
| Wisconsin Üniversitesi (UW) solüsyonu | reaktif | DURAMED | 1000-46-06 | |
| Hank’s Dengeli Tuz Solüsyonu (HBSS) | reaktif | Mediatech, Inc. | 99-597-CM | |
| %25 İnsan Albumini | reaktif | GRIFOLS | NDC 61953-0002-2 | |
| M199 medyumu (yıkama solüsyonu) | reaktif | Mediatech, Inc. | 99-784-CM | |
| Kollagenaz NB1 GMP kalite | reaktif | SERVA Electrophoresis | N0002937 | |
| Nötr Proteaz NB1 GMP kalite | reaktif | SERVA Electrophoresis | N0002936 | |
| Betadine | reaktif | Cardinal Health | 29906-004 | |
| Sefazolin | reaktif | West-Ward Pharmaceutical | NDC 0143-9924-90 | |
| Ditizon | reaktif | Sigma-Aldrich | D5130 |
Kaynaklar
- Shapiro, A. M., et al. Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen. N Engl J Med. 343, 230-238 (2000).
- Nano, R., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
