שימוש סרטן הפרסה, Limulus פוליפמוס, מחקר חזון
Summary
בסרט זה אנו מבצעים הקלטה electroretinogram, הקלטה עצב הראייה, הקלטה intraretinal עם הסרטן האמריקנית פרסה,<em> Limulus פוליפמוס</em>. פרדיגמות אלו אלקטרו יכול לשמש חוקר את הבסיס העצבי של חזון במחקר מעבדה או הוראה.
Abstract
סרטן פרסה האמריקאי, Limulus פוליפמוס הוא אחד היצורים העתיקים ביותר על פני האדמה, החיה ממשיכה לשחק תפקיד חיוני במחקר ביו. לא רק דמם מכיל תאים מיוחדים המדענים להשתמש כדי לזהות bacteriotoxins בתרופות שלנו, אבל העיניים שלהם מכילים גם רשת עצבית כי סיפקה תובנה הרבה על תהליכים פיזיולוגיים הפועלים מערכת הראייה שלנו, כגון הסתגלות קלה עיכוב לרוחב. סרטן פרסה נשאר מודל אטרקטיבי מחקר חזון כי בעל החיים הוא גדול hardy עבור חסרי חוליות, הנוירונים ברשתית שלה גדולים ונגישים, מערכת הראייה שלה הוא קומפקטי למד בהרחבה, התנהגות החזותי שלה מוגדר היטב. יתר על כן, המבנה והתפקוד של העיניים מווסתת על בסיס יומי על ידי השעון הביולוגי במוח של בעלי חיים. בקיצור, מערכת הראייה של סרטני פרסה היא פשוטה מספיק כדי להבין זאת מורכבת מספיק כדי להיות מעניין.
בסרט זה אנו מציגים three פרדיגמות אלקטרו עבור חוקרת את הבסיס העצבי של חזון זה ניתן לבצע in vivo עם Limulus. הם electroretinogram הקלטה, הקלטה עצב הראייה, הקלטה intraretinal. Electroretinogram (ERG) הקלטות למדוד עם משטח אלקטרודה חשמלית סיכם את התגובה של כל התאים בעין אל בהבזק אור. הם יכולים לשמש כדי לפקח על הרגישות הכוללת של העין עבור להאריך את פרקי הזמן. הקלטות עצב הראייה למדוד את פעילות spiking של סיבי עצב בודד באמצעות אלקטרודה מיקרו תאית. הם יכולים לשמש ללמוד העביר מסרים חזותיים מן העין אל המוח, כמו גם היממה לשעון הודעות מוזן חזרה מהמוח אל העין. למדוד הקלטות Intraretinal עם microelectrode תאיים תנודות המתח המושרה על ידי אור תאים בודדים של העין. הם יכולים לשמש להבהיר מנגנוני הסלולר של עיבוד ברשתית.
Protocol
Discussion
יש לנו להדגים כיצד לבצע הקלטות ERG, הקלטות עצב הראייה, והקלטות intraretinal על סרטני הפרסה in vivo. טכניקות הקלטה כל לספק תובנות שונות לתוך הבסיס העצבי של חזון, והם יכולים לשמש כדי לחקור פונקציה הרשתית הודות בבעלי חיים כדי עיניים גדולות של סרטן ו שריון קשה. פעילות עצב הראייה יכול…
Acknowledgements
המחברים רוצים להכיר בירגיט ד"ר ורנר על עזרתה בהפקת עם המאמר הזה וידאו. מחקר זה מומן על ידי פרס קריירה NSF.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| LED | Light source | Newark Inc | 33C1292 | |
| Suction electrode | Electrode | A-M Systems, Inc | 573000 | |
| XCell 3*4-Channel Extracellular Amplifier | Amplifier | FHC Inc. | 40-40-8B | |
| Intracellular Recording | Amplifier | Cygnus | IR-283A | |
| APM | Neural Spike Discriminator | FHC Inc. | APM | |
| Bits++ | Video Board | Cambridge Research Systems Inc | Bits++ | |
| Piezopatch Manipulator | Micropositioner | WPI Inc | PPM5000 | |
| Square Pulse Stimulator | Nerve Stimulator | Grass Instrument Division, Astro-Med, Inc. | Model S48 | |
| P-97 | Micropipette Puller | Sutter Instruments | Model P-97 | |
| Borosilicate Glass Capillary | Electrode glass | WPI Inc | 1B150-4 | |
| Horseshoe crab (Limulus polyphemus) | Animal | Marine Biological Laboratories | ||
| Micropipette Puller | Glass Puller | Sutter Instruments | P-97 | |
| Zoom Stereoscope | Microscope | Jed Pella Inc. | SMZ-168 |
References
- Barlow, R. B. Circadian rhythms in the Limulus visual system. J. Neurosci. 3, 856-870 (1983).
- Passaglia, C. L., Dodge, F. A., Barlow, R. B. Cell based model of the Limulus lateral eye. J. Neurophysiol. 80, 1800-1815 (1998).
- Snodderly, D. M. Processing of visual inputs by the brain of Limulus. J. Neurophysiol. 34, 588-611 (1971).
- Passaglia, C., Dodge, F., Herzog, E., Jackson, S., Barlow, R. Deciphering a neural code for vision. Proc. Natl. Acad. Sci. 94, 12649-12654 (1997).
- Barlow, R. B., Kaplan, E. Limulus lateral eye: properties of receptor units in the unexcised eye. Science. 174, 1027-1029 (1971).
- Bolbecker, A. R., Lewis, A. R., Swan, A. A., Carlson, K., Fleet, J. R., Beck, K. E., Wasserman, G. S. Stable Bellows Cup Electrode Demonstrates Low-frequency Properties of Long-term Electroretinographic Recordings in the Limulus Lateral Eye. J. Neurosci. Meth. 159, 252-260 (2007).
